Vigilancia de laboratorio de dengue y otros arbovirus en Cuba, 1970-2017 / Laboratory surveillance of dengue fever and other arboviruses in Cuba, 1970-2017

Los arbovirus constituyen una de las principales causas de emergencia en salud por la morbilidad y mortalidad que producen y el estrés sanitario que conllevan. Cuba no ha estado excenta de riesgo, y el enfrentamiento del dengue inicialmente y de otros arbovirus después, ha sido, y es, una prioridad de las máximas autoridades del país. La vigilancia de laboratorio de dengue se estableció desde inicios de la década del 70 aunque sus objetivos y estrategias han cambiado según la situación epidemiológica nacional y regional y la tecnología de diagnóstico disponible. Se destacan cuatro etapas en su desarrollo. En este trabajo se resumen las estrategias desarrolladas para la vigilancia de laboratorio de dengue y de otros arbovirus en el periodo de 1970 a 2017. Se describe además el papel desempeñado por el Instituto de Medicina Tropical, ¨Pedro Kouri¨ (IPK) como Laboratorio Nacional de Referencia(AU)

Arboviruses are one of the leading causes of health emergencies due to their morbidity and mortality and the sanitary stress they bring about. Cuba has not been free from risk, and the response first to dengue fever and then to other arboviruses has been and still is a priority for the country's top authorities. Laboratory surveillance of dengue fever was implemented in the 1970s, though its aims and strategies have evolved in keeping with the national and regional epidemiological situation, and the available diagnostic technology. Four stages stand out in the development of dengue laboratory surveillance. The present paper summarizes the strategies developed for laboratory surveillance of dengue fever and other arboviruses in the period 1970-2017. A description is also provided of the role played by Pedro Kourí Tropical Medicine Institute (IPK) as a national reference laboratory(AU)

Obtención de la sublínea celular CLA-HT. Estudio de su sensibilidad para el aislamiento y multiplicación de los virus del dengue / Obtainment of CLA-HT cell subline and study of its susceptibility for the isolation and multiplication of the dengue virus

Introducción: en el diagnóstico de dengue es importante la determinación del serotipo viral. A pesar de existir otros métodos, el aislamiento viral en cultivos de células y la identificación por la técnica de inmunofluorescencia siguen siendo muy utilizados. Por lo tanto, la búsqueda de sistemas celulares más sensibles ha sido un tema reiterado durante muchos años para el virus dengue y otros agentes. Objetivo: obtener una sublínea celular a partir del clon CLA-1 (Aedes pseudoscutellaris) que crece a 28 ºC, capaz de multiplicarse a 33ºC (CLA-HT) y evaluar su utilidad para el aislamiento y la identificación de los virus del dengue. Métodos: a partir del clono CLA-1 de la línea celular AP-61(Aedes pseudoscutellaris) se obtuvo por selección una cepa o sublínea celular CLA-HT capaz de crecer a 33 °C. Se estudió su sensibilidad para la multiplicación de los 4 serotipos del virus del dengue y su eficiencia para el aislamiento directo de sueros de pacientes en fase aguda de la enfermedad, ambos comparativamente con la línea C6/36HT (A. albopictus). Resultados: la sublínea CLA-HT permitió el crecimiento de los 4 serotipos del virus dengue aunque para algunos requirió más tiempo que la C6/36 HT. Para el aislamiento a partir de muestras de sueros colectadas de individuos en fase aguda, la sublínea CLA-HT detectó el virus en el 40 por ciento de las muestras, mientras que C6/36 detectó el virus en el 50 por ciento. Discusión: CLA-HT es capaz de detectar todos los serotipos del virus dengue a partir de las 96 horas pos inoculación, por lo que es útil para la investigación como sistema alternativo y su eficiencia de aislamiento directo es buena para aplicar en grandes brotes. Además, la principal ventaja es que es posible utilizarla para proporcionar una respuesta rápida a situaciones emergentes en laboratorios de escasos recursos, ya que no precisa de condiciones de incubación con CO2. Conclusiones: se obtuvo una sublínea CLA-HT a partir de la línea CLA-1 capaz de crecer a 33ºC, la cual detecta los 4 serotipos del virus dengue. Su eficiencia de aislamiento es ligeramente menor que la sublínea C6/36 HT, pero se puede utilizar como sistema alternativo para el aislamiento de los virus dengue sobre todo en laboratorios con bajos recursos que no cuenten con condiciones óptimas de incubación(AU)

Introduction: the identification of viral serotypes is an important issue for dengue diagnosis. Despite the existence of other identification methods, the viral isolation in cell cultures and determination by immunofluorescent technique remain as the most used. Therefore the search for more sensitive cellular systems has been a repeated topic during many years for dengue virus and other agents. Objective: to obtain a cell subline from CLA-1 clone (Aedes pseudoscutellaris), that grows at 28 °C, capable of multiplying at 33 °C (CLA-HT)and to evaluate its usefulness for Dengue virus isolation and identification. Methods: by using a CLA-1 clone of the AP-61(Aedes pseudoscutellaris) cell line, it was possible to obtain a strain or cell subline CLA-HT capable of growing at 33 oC (CLA-HT) through a temperature selection method. Its sensitivity for the multiplication of the 4 dengue virus serotypes and its efficiency for direct virus isolation from acutely ill patients' sera were studied in comparison to C6/36 HT cell line (A. albopictus). Results: four dengue virus serotypes grew in CLA-HT cell subline but some serotypes were detected later in CLA-HT than in C6/36 HT. For dengue isolation from serum samples taken in acutely ill patients, the CLA-HT subline detected 40 percent positive samples whereas C6/36 HT did 50 percent. Discussion: CLA-HT is able to detect all dengue virus serotypes from 96 hours on post inoculation. It makes the new cell line useful for research as an alternative system and the direct isolation efficiency is good to be applied in large outbreaks. The most important advantage of CLA-HT is the possibility of giving rapid answer in emergency situations in low resource laboratories since it does not require special incubation conditions with CO2. Conclusions: a CLA-HT subline was obtained from CLA-1 line and it grows at 33 oC and capable of detecting 4 dengue virus serotypes. Its isolation efficiency is slightly lower than that of C6/36 HT subline, but it may be used as an alternative system for dengue virus isolation, mainly in resource-poor laboratories that do not have the optimal conditions for incubation(AU)

Secuencias de infección viral asociadas a la fiebre del dengue durante la epidemia de dengue 3 en la ciudad de La Habana, 2001-2002 / Viral infection sequences related to dengue fever in dengue 3 epidemics occurred in the City of Havana, 2001-2002

Objetivo: estudiar el papel de la infección secundaria y de la influencia de determinadas secuencias de infección virales en los casos de fiebre del dengue durante la epidemia de dengue 3, en la ciudad de La Habana, 2001-2002. Métodos: se estudiaron 141 muestras clínicas de casos confirmados de dengue en la epidemia cubana dengue 3. Todos los casos incluidos fueron clasificados de acuerdo con el criterio de la OMS como casos de fiebre del dengue, 101 de estas muestras fueron colectadas en la fase aguda de la enfermedad y 40 colectadas en la fase convaleciente tardía (16-18 meses después de la enfermedad). Resultados: los sueros colectados en la fase convaleciente tardía permitieron conocer las secuencias virales de infección, las cuales en orden descendiente fueron DEN-1/DEN-3, DEN-2/DEN-3 y DEN-1/DEN-2/DEN-3. Conclusiones: los resultados confirman que la secuencia de infección DEN-2/DEN-3 estuvo asociada a los casos de fiebre del dengue y no a los de fiebre hemorrágica del dengue; un porcentaje elevado de los casos estudiados se correspondió con una infección secundaria.

Objective: To study the role of secondary infection and of certain viral infection sequences in dengue fever cases during the dengue 3 epidemics occurred in the City of Havana. Methods: One hundred and forty one laboratory-confirmed clinical samples from dengue 3 cases were studied. According to WHO criteria, all included cases were classified as dengue fever cases; 101 of these samples were collected at the acute phase of the disease whereas 40 were collected in the late convalescence (16 to 18 months after the onset of disease). Results: The late convalescence serum samples allowed identifying the viral dengue infection sequences, which in downward order were DENV-1/DENV-3, DENV-2/DENV-3 and DENV-1/DENV-2/DENV-3. Conclusions: The results confirmed that the sequence infection DENV-2 / DENV-3 was associated with Dengue Fever Cases but not with the Dengue Hemorrhagic Fever Cases and that a high percentage of studied cases proved to be secondary infection.

Producción ex vivo de TNFa y óxido nítrico por células sanguíneas en presencia de virus dengue / TNFa and nitric oxide ex vivo production by blood cells due to dengue virus

Objetivo: niveles elevados de TNFa se han vinculado al desarrollo de la forma clínica severa de la infección por dengue. La producción de óxido nítrico parece estar disminuida en casos con fiebre hemorrágica del dengue al comparar con la fiebre dengue, sin embargo, no se conoce el papel de estos mediadores en una infección terciaria por el virus. Métodos: la capacidad de las células sanguíneas de individuos con antecedentes de infección por dengue de producir TNFa y óxido nítrico al ser cultivadas con un serotipo diferente del virus en una infección terciaria ex vivo, fue medida en los sobrenadantes de cultivo mediante el empleo de un estuche ELISA comercial y el test de Griess, respectivamente. Resultados: la estimulación con virus dengue indujo la liberación de altos y variables niveles de TNFa en el sobrenadante de células de sangre total de los individuos estudiados, apoyando el posible papel del TNFa en la patogénesis de una infección terciaria sintomática por dengue. La síntesis de óxido nítrico, en las condiciones experimentales estudiadas, no difirió entre casos con historia de fiebre dengue y fiebre hemorrágica del dengue, al parecer estaba algo inhibida en presencia de anticuerpos heterotípicos. Conclusiones: los niveles diferenciales de síntesis de TNFa entre individuos pudieran tener implicaciones en el desarrollo de una infección natural terciaria por dengue.

Objective: High TNFa levels have been associated with the development of severe forms of dengue virus infection. The NO production seems to be lower in dengue hemorrhagic fever cases compared to dengue fever cases. However, the role of those mediators in the tertiary dengue infection has not been discovered yet. Methods: The ability of whole blood cells from individuals with a history of dengue infection of producing TNFa and Nitric oxide (NO) when cultured with a different serotype of dengue virus mimicking an ex vivo tertiary infection, was measured in the culture supernatants by using a standard ELISA kit and Griess test, respectively. Results: Dengue virus stimulation induced the release of very high and variable TNFa levels in whole blood cells supernatant, thus supporting the possible role of this cytokine in the pathogenesis of a symptomatic tertiary dengue infection. In these experimental conditions, there was no difference in the NO synthesis between DF and DHF cases, showing an apparent inhibition due to heterotypic antibodies. Conclusions: The dispersion of TNFa levels among individuals could have some effects on the development of a tertiary natural dengue infection.

Estudio de algunas propiedades biológicas de 3 cepas de dengue 2 con diferencias en sus secuencias nucleotídicas / Study of various biological properties of 3 strains of dengue 2 with differences in their nucleotide sequences

Some biological properties of Dengue-2 strains such as A-15 (isolated in Cuba in 1981); Jamaica (isolated in Jamaica in 1981) and New Guinea "C" (NG"C") standard strain differing in their nucleotide sequences were studied. The results showed that the cytopathic effect in C6/36 HT cell line occurred earlier in A-15 strain and that fluorescence was first detected in Jamaica and A-15 strains. This seems to indicate that rapid detection of strains does not have any relation to neither their history of passage nor the original isolation system. A-15 and NG"C" strains exhibited an heterogeneous pattern formed by big and small plaques but average size of plaques in NG"C" was lower whereas Jamaica showed only small plaques. The most neurovirulent strain in mice was NG"G" followed by A-15 whereas Jamaica was not neurovirulent at all. These results indicate that A-15 has a different biological behaviour which is probably due to intrinsic differences. It should be taken into account that 7 amino acid changes were found in the envelope protein which may have affected the expression of some biological properties.

Reacción en cadena de la polimerasa para la detección rápida y determinación del serotipo de virus del dengue en muestras clínicas / Polymerase chain reaction for rapid detection and serotyping of dengue viruses in clinical samples

El trabajo que aquí se presenta describe las ventajas de usar la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RCP-TI) para detectar e identificar con rapidez virus del dengue en muestras clínicas. Se sometieron directamente a RCP-TI 27 muestras obtenidas de pacientes con fiebre de dengue y fiebre hemorrágica de dengue durante epidemias en Colombia, Nicaragua y Panamá. El ADN de cadena doble obtenido con la RCP-TI se identificó mediante una segunda amplificación (RCP de anidación) utilizando cebadores específicos para cada tipo de virus, aislamiento vírico e inmunofluorescencia indirecta (IFI) y con electroinmunoensayo enzimático detector de anticuerpos IgM contra el virus del dengue. El genoma vírico amplificado se detectó e identificó en un máximo de 8 horas. Los parámetros calculados para hacer el diagnóstico por RCP-TI, usando el aislamiento vírico y la IFI como estándar de oro, fueron una sensibilidad de 100%; una especificidad de 78%; un valor predictivo positivo de 69% y un valor predictivo negativo de 100%. Cabe notar que dos de los especímenes que dieron resultados positivos a la prueba de RCP-TI anidada y negativos al aislamiento vírico mostraron anticuerpos específicos de tipo IgM. Los resultados de la RCP-TI en general mostraron una estrecha concordancia con los del aislamiento vírico, lo cual sugiere que la RCP es un procedimiento que facilita enormemente el diagnóstico rápido y temprano del dengue.

This study describes the benefits of using reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) for the rapid detection and typing of dengue virus in clinical samples. Twenty-seven serum specimens from patients with dengue fever and dengue hemorrhagic fever in Colombia, Nicaragua, and Panama were directly subjected to RT-PCR for the detection of dengue virus. The resulting double-stranded DNA product was typed by a second round of PCR amplification (nested PCR) with type specific primers, viral culture/indirect immunofluorescence (IIF), and enzyme-linked electroimmunoassay for IgM anti-dengue antibodies. The amplified virus genome was detected and typed within 8 hours. Nested RT-PCR, using viral culture and IIF as the gold standard, showed 100% sensitivity; 78% specificity; 69% positive predictive value, and 100% negative predictive value. It is noteworthy that two of the specimens whose results were positive with nested RT-PCR and negative with viral culture showed specific IgM antibodies. The results of the RT-PCR were in close agreement with those obtained through viral culture. This suggests PCR can greatly facilitate the rapid and early diagnosis of dengue infection.

Dengue in Nicaragua, 1994: reintroduction of serotype 3 in the Americas / Dengue en Nicaragua, 1994: reintroducción del serotipo 3 en las Américas

El objetivo principal de este informe fue describir la reaparición del serotipo 3 del dengue en las Américas después de 17 años de ausencia, tal como se observó recientemente en Nicaragua. Se examinaron en total 356 muestras de suero obtenidas por medio del sistema nicaragüense de vigilancia del dengue durante una epidemia en octubre de 1994. En 43% de las muestras se detectaron anticuerpos IgM contra el dengue y los sueros de 12 de las 18 áreas atendidas por los sistemas locales integrales de salud dieron resultados positivos. Además, se aislaron virus de dengue en 5 de 24 sueros de pacientes con síntomas hemorrágicos: en 3 se aisló el serotipo 3 y en 2, el serotipo 1. Mediante pruebas de laboratorio, en 26 de 39 pacientes hospitalizados en León y Managua se consideró probable o se confirmó el diagnóstico de dengue con manifestaciones hemorrágicas o dengue hemorrágico. En 18 pacientes diagnosticados de dengue con manifestaciones hemorrágicas, los síntomas más comunes fueron fiebre, cefalea, vómito, mialgia, artralgia y epistaxis. Los ocho pacientes restantes, en los que se diagnosticó dengue hemorrágico probable, tuvieron fiebre, malestar general, hemorragias, trombocitopenia y hemoconcentración, y los títulos de anticuerpos a la prueba de inhibición de la hemaglutinación oscilaron de 640 a 20 480. Se confirmó así la reintroducción del serotipo 3 del dengue en la Región y su capacidad para producir casos de dengue hemorrágico. En Nicaragua, por lo menos, es evidente que la reintroducción del serotipo 3 del dengue ha producido un aumento de los casos de dengue clásico y dengue hemorrágico. Si no se presta atención urgente al control del mosquito vector de la enfermedad, la experiencia descrita podría constituir el preludio lúgubre de futuros acontecimientos similares en las Américas

The principal aim of the report presented here is to describe the reappearance of dengue serotype 3 in the Americas, following a 17-year absence, through the recent experience of Nicaragua. In all, 356 serum samples obtained through Nicaragua's dengue monitoring system in October 1994 during an epidemic were examined. Anti-dengue IgM antibodies were detected in 43% of these, with sera from 12 of the 18 areas covered by Nicaragua's local integrated health care systems yielding positive results. In addition, dengue virus was isolated from 5 of 24 sera obtained from patients with hemorrhagic symptoms, dengue 3 being isolated from 3 of these samples and dengue 1 from the other 2. A diagnosis of dengue with hemorrhagic manifestations or of hemorrhagic dengue was supported or confirmed by laboratory findings obtained from 26 of 39 patients hospitalized in León or Managua. The most frequent symptoms of 18 patients diagnosed as having dengue with hemorrhagic manifestations were fever, headache, vomiting, myalgia, arthralgia, and epistaxis. The remaining eight patients, diagnosed as having probable hemorrhagic dengue, exhibited fever, general malaise, hemorrhaging, thrombocytopenia, hemoconcentration, and hemagglutination-inhibition antibody titers ranging from 640 to 20 480. Overall, the reappearance of dengue serotype 3 in the Region was confirmed, together with its ability to produce cases of hemorrhagic dengue. At least in Nicaragua, it is apparent that the introduction of dengue serotype 3 has prompted an increase in the number of classical dengue and hemorrhagic dengue cases, a scenario that might constitute the grim prelude to future developments in the Americas if urgent attention is not given to controlling the disease's mosquito vector

Estudio por Western Blot de sueros de pacientes con neuropatía epidémica / Study by Western Blot of sera from patients with epidemical neuropathy

Se estudió la respuesta inmune de un grupo de pacientes con neuropatía epidémica y de individuos controles mediante la tècnica de inmunoblotting frente a las proteinas del virus Coxsackie y a las proteínas de la cepa de efecto lento aislada en nuestro laboratorio. Se estudiaron 13 sueros de pacientes con neuropatía epidémica y 9 sueros controles. De los 13 sueros estudiados, 8 (61,5 por ciento) reconocieron a la proteína VPI y 2 sueros (15,3 por ciento) a la proteína VPO de la cepa 47/93. De los 9 controles estudiados, 4 (44,4 por ciento) reconocieron la proteína VPI y 3 sueros (33,3 por ciento) la proteína VPO solamente. Con el antígeno preparado a partir de la cepa de efecto lento, en 5(38,5 por ciento) sueros de pacientes con 2 sueros (22,5 por ciento) de controles se obtuvo una señal específica. Es de destacar en este último caso que la proteína observada tenía un peso molecular de 41 300 D, era de menor talla que la proteína precursora detectada frente a la cepa 47/93, que fue de 45 000 D

Diagnóstico virológico de un brote de fiebre y rash producido por Parvovirus B19, Cuba, 1995 / Virologycal diagnosis of an aoutbreak of fever and rash caused by Parvovirus B19, Cuba, 1995

Se reportan los resultados obtenidos en el estudio de un brote de fiebre y rash ocurrido en Ciudad de La Habana en marzo de 1995. En las muestras de 35 pacientes se descartaron dengue, sarampión, rubéola, herpes simple y Epstein Barr como agentes causales del brote. Mediante la detección de anticuerpos IgM y la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (RCP) se identificó al Parvovirus B19 como agente causal del brote. En 14/18 muestras (77,7 por ciento) se comprobó la infección por este agente por alguna de las técnicas empleadas. Este estudio se refiere al primer brote confirmado de Parvovirus B19 en Cuba

Mecanismo de participación de los Enterovirus en la neuropatía epidémica. Hipótesis fisiopatológica / Mechanism of participation of the enterovirus in the epidemic neuropathy. Physiopathological hypotheses

Durante la neuropatía epidémica ocurrida en Cuba en los años 1992 y 1993, se obtuvieron del líquido cefalorraquídeo de pacientes aislamientos virales relacionados antigénicamente con los virus Coxsackie. Conjuntamente con las investigaciones virológicas se efectuaron otras de tipo epidemiológicas, toxicológicas, nutricionales, inmunológicas e histopatológicas. A pesar que la enfermedad estuvo unida a factores tóxicos-nutricionales, no ha sido posible identificar la causa de la epidemia. Teniendo en consideración los resultados obtenidos en las distintas investigaciones, hemos formulado una hipótesis integral, multifactorial, para explicar el mecanismo fisiopatológico de la participación de los virus aislados como mediadores de un proceso de autoinmunidad en la patogenia de la enfermedad

Secuenciacion directa de un producto amplificado de una muestra de suero / Direct sequence of an amplified product from a serum sample

Se reporta la secuencia nucleotida y aminoacidica de una zona de gran variabilidad en el genoma del virus dengue 2 a partir del ARN del virus original sin pase en ningun sistema de aislamiento y se compara con la primera cepa de dengue 2 aislada durante la epidemia de 1981 con 4 pases en raton lactante. Los resultados demuestran que la secuencia nucleotidica del suero y de la cepa A15 son iguales

Neuropatia epidemica cubana. Parte II. Algunas caracteristicas antigenicas de los aislamientos virales / Cuban epidemic neuropathy. Part II. Certain antigenic characteristics of viral isolations

Con el objetivo de caracterizar antigenicamente los aislamientos productores de efectos citopatico ligero (ECP-L) obtenidos del liquido cefalorraquideo (LCR) de pacientes con neuropatia epidemica se realizaron prueba de Western Blot y neutralizacion utilizando sueros hiperinmunes de pacientes y sueros de conejos hiperinmunes. Se comprobo que los aislamientos de ECP-L estudiados tienen iguales caracteristicas antigenicas y estan relaciondos con los virus Coxsackie A9 y B4. No se pudo detectar en las cepas de ECP-L proteinas estructurales y solamente se comprobaron antigenos que por su alto peso molecular fueron considerados proteinas precursoras del ciclo de replicacion viral

Neuropatia epidemica cubana. Parte IV. Relacion antigenica de los aislamientos virales con estructuras del sistema nervioso central. ?Posible mecanismo etiopatogenico? / Cuban epidemic neuropathy. Part IV. Antigenic relation of viral isolations to central nervous system structures. A possible etiopathogenic mechanism?

Se presentan resultados que permiten plantear la existencia de relaciones antigenicas entre los virus aislados del liquido cefalorraquideo de pacientes con neuropatia epidemica y estructuras del sistema nervioso central humana. Estas evidencias se han obtenido por 2 vias distintas e independientes: 1)por metodo de doble difusion en agarosa, inmunoblot e inmunohistoquimicos, comprobandose que los anticuerpos inducidos por los virus aislados reaccionan con antigenos del sistema nervioso central y perferico, 2)el suero obtenido por inmunizacion de un conejo con extracto de cerebro humano neutraliza los mismos virus que los neutralizados por los sueros hiperinmunes obtenidos con los aislamientos. Se discute la posible participacion de los virus como mediadores de un proceso autoinmune en la etiopatogenia de la enfermedad

Caracterizacion fisico-quimica de los agentes aislados durante el brote de neuropatia epidemica en Cuba. Parte I / Physical and chemical characterization of isolated agents during the outbreak of epidemic neuropathy in Cuba. Part I

En el presente trabajo se reportan las caracteristicas fisico-quimicas presentadas por los agentes aislados con muestras de pacientes con neuropatia epidemica. Los Enterovirus aislados se comportaron en la forma descrita para estos virus. Los agentes productores de efecto citopatico ligero (ECP-L) se comportaron en forma variable en lo que se refiere a la sensibilidad al cloroformo, por otra parte no fueron sensibles al acido fosfonoacetico (PAA) ni al cloruro de guanidina (GHCl) y crecieron en celulas previamente tratadas con bromodeoxiuridina (BDUR). Estos resultaron sugirieron la presencia de 2 agentes que recuerdan a los Enterovirus y a virus envueltos. Se necesita continuar profundizando en los estudios de caracterizacion de estos agentes

Caracterizacion fisico-quimica de los agentes aislados durante el brote de neuropatia epidemica en Cuba. Parte II / Physical and chemical characterization of isolated agents during the outbreak of epidemic neuropathy in Cuba. Part II

En el presente estudio se demuestra la presencia de 2 agentes con caracteristicas culturales diferentes, tanto de una cepa de Cox A9, como en una productora de efecto citopatogenico ligero (ECP-L), ambas aisladas de pacientes con neuropatia epidemica. Mediante neutralizacion del Cox A9 con un suero hiperinmune homologo se desarrollo en la dilucion 10 a la 4 un ECP-L que se propago en pases sucesivos. Se realizo un gradiente de sacarosa a una cepa productora de ECP-L, y de una de las fracciones pasada en el cultivo de tejido en presencia de acido fosfonoacetico (PAA) se desarrollo en ECP tipico de Enterovirus. Se discute el posible rol patogenico de estos

Factores que influyen en el crecimiento del agente productor del efecto citopatico ligero aislado en pacientes con neuropatia epidemica / Factors influencing upon the growth of the mild cytopathogenic effect producing agent isolated from patients presenting with epidemic neuropathy

En el presente reporte se describen algunos factores que influyen en el crecimiento del agente productor del efecto citopatico (ECP) ligero aislado a partir de liquido cefalorraquideo de pacientes de neuropatia epidemica. Se demostro que la concentracion de NaHCO3 fue decisiva para la apariciondel ECP. Concentraciones determinadas de MnCL2 permitiron la visualizacion del ECP e incrementaron ekl rendimiento viral

Normalizacion del metodo de placas para los virus aislados en pacientes con neuropatia epidemica / Normalization of the plaque method for viruses isolated from patients presenting with epidemic neuropathy

En el presente reporte se presentan las condiciones necesarias para el desarrollo de placas en los agentes productores de efecto citopatico ligero que fueron aislados de muestras de liquido cefalorraquideo de pacientes con neuropatia epidemica